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光度准确度与光谱带宽的关系
来源:http://www.lab-spectrum.com/   作者:紫外可见分光光度计    更新日期:2014-07-25 21:07:58   
摘要:光谱带宽是紫外分光光度计分析误差的主要来源之一。一般来讲,目前国内外的紫外分光光度计的仪器研究者或制造者,在给出AA或TA时,都不讲明在什么光谱带宽(SBW)条件下测量。这个问题很值得探讨,应引起广大紫外可见分光光度计的研制者和使用者们的高度视。

       光谱带宽是紫外分光光度计分析误差的主要来源之一。一般来讲,目前国内外的紫外分光光度计的仪器研究者或制造者,在给出AA或TA时,都不讲明在什么光谱带宽(SBW)条件下测量。这个问题很值得探讨,应引起广大紫外可见分光光度计的研制者和使用者们的高度视。
A.J.Owen在1988年指出:“吸光度测量的准确度,取决于仪器的SBW与样的自然带宽(NBW)的比率。”(自然带宽被定义为最大吸收值的1/2处的吸谱带宽度)。Knowles和A.J.Owen在大量实验的基础上指出:SBW/NBW≤O.1时,吸光度准确度可高达99. 5%;如果SBW/NBW增大,则吸光度测量误差会增加。A.J.Owen还指出,NBW≥20时,2nm的SBW对于吸光度的准确测定是足够的,可满足大约99%的日常分析。这也是我国药典规定用于药检的紫外可见分光光度计的SBW一定要求≤2nm的主要原因。
笔者的研究也表明:光度准确度测量时,必须注意SBW的选择。具体理由如下。
①SBW小,则对应的狭缝宽度小,此时的杂散光也小,可提高吸光度测量的准确度。
②SBW小,对同一自然带宽(NBW)来讲,波长准确度会高。因为不同的波长,有不同的摩尔吸光系数,所以,波长准确度高时,Beer定律的偏离也会小,即光度准确度测试误差小。
③SBW小,则对应的狭缝窄,但单色光的单色性也好,更能接近单色光,可减少Beer定律的偏离,提高测量精度。
但必须注意:SBW不能太小,否则信号弱,仪器的信噪比小,灵敏度差。
不少仪器说明书中或在有关的仪器样本中经常混淆狭缝宽度和光谱带宽,这是很错误的,原因如下。
第一,狭缝宽度是指紫外可见分光光度计狭缝的机械宽度。一般来讲,仪器的狭缝宽度是一个保密数据。因此,制造商不会或没有必要在仪器说明书中、在有关的仪器样本上给出仪器的狭缝宽度,所以讲狭缝宽度为:多少是没有根据的。
第二,仪器制造商应该或必须告诉用户仪器的光谱带宽是多少。因为光谱带宽是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源,往往不同的试样要求用不同的光谱带宽测试。对试样来讲,有最佳光谱带宽的要求。
我们必须指出:光谱带宽以nm计,而狭缝宽度以mm计,二者在计量单位上相差100万倍。

 

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